การโคลนยีน 1-Aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) Synthase ในกระบวนการสังเคราะห์เอทิลีน ของกล้วยไม้รองเท้านารีพันธุ์เหลืองปราจีน และการแสดงออก
นุกูล อ่อนนิ่ม ปิยะศักดิ์ ชอุ่มพฤกษ์ และ พีระศักดิ์ ฉายประสาท
วารสารวิทยาศาสตร์เกษตร 41 : 1 (พิเศษ) : 15-18 (2553)
2553
บทคัดย่อ
1-Aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC)synthaseเป็นเอ็นไซม์ที่มีบทบาทสำคัญในกระบวนการสังเคราะห์เอทิลีน ซึ่งเป็นตัวกระตุ้นให้เกิดการเสื่อมสภาพของดอก ได้โคลนชิ้นส่วนของยีนสร้างเอมไซม์ ACC synthase ของกล้วยไม้รองเท้านารีพันธุ์เหลืองปราจีน (Paphiopedilum concolor (Lindl.) Pfitzer) โดยการสกัด mRNA และสังเคราะห์ cDNAด้วยวิธี RT-PCR (Reverse transcriptase Polymerase Chain Reaction) ด้วยไพรเมอร์ที่จำเพาะที่ออกแบบจากส่วนอนุรักษ์ของยีน ACC synthase ในกล้วยไม้ชนิดอื่น ผลที่ได้จากการทำ RT-PCR ได้ชิ้นยีนขนาด 247 คู่เบส การโคลนและหาลำดับนิวคลีโอไทด์พบว่า ลำดับนิวคลีโอไทด์ที่ได้สอดคล้องกับยีน ACC synthase การศึกษาการแสดงออกของยีนนี้ในดอกกล้วยไม้รองเท้านารีพันธุ์เหลืองปราจีนที่ระยะดอก4 ระยะในส่วนต่างๆ ของดอกได้แก่ รังไข่ กลีบนอกบน(หลังคา) กลีบนอกล่าง โล่ กระเป๋า กลีบดอกซ้าย และกลีบดอกขวาพบว่า ยีน ACC synthase มีการแสดงออกที่บริเวณรังไข่ กลีบนอกบน(หลังคา) กลีบนอกล่าง และโล่ สูงสุดที่ระยะ 12 วันหลังดอกบานเต็มที่ และพบการแสดงออกมากที่ กระเป๋า กลีบดอกซ้าย และกลีบดอกขวา ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า รูปแบบการแสดงออกของยีนขณะดอกพัฒนาเข้าสู่ระยะเสื่อมสภาพ ซึ่งสามารถใช้เป็นข้อมูลพื้นฐานในการศึกษา และควบคุมการแสดงออกของยีนต่อไป